Imagerie ionique : microscope inversé

 

Ce système permet de suivre les flux ioniques de type calciques dans des cellules en culture chargées de fluorophore (Fura-2, Mag-Fura-2, Indo-1, ...) et d'enregistrer les courants ioniques par la technique du Patch clamp. Les cellules peuvent être stimulées électriquement lors des enregistrements.

Un système de perfusion permet l'application de substances diverses. Le chauffage de la chambre d'enregistrement permet de travailler dans des conditions proches des conditions de température physiologique.

Caractéristiques du système

Microscope : Olympus inversé IX71 non motorisé

un condenseur DIC

Sources lumineuses :

Monochromateur Polychrome V (TILL Photonics)

Lampe halogène 12V pour la transmission + obturateur Uniblitz

Objectifs : Olympus

- Plan Apochromat 10 X, ouverture numerique 0.40

- Plan semi Apochromat 40 X long working distance, ouverture numerique 0.60

- UV Apochromat 40 X immersion à huile ouverture numérique 1.35, spécial excitation UV à 340 nm

- Plan semi Apochromat 60 X immersion à huile ouverture numérique 1.25

- Lentille type Optovar 1.6x

Filtres dans le statif :

- FITC : HQ480/40x, Q505LP, HQ535/50m

- Fura-2 : pas de filtre d'excitation, 400DCLP, D510/80m

- Indo-1 : D365/10x , 380DCLP

Filtres dans le Dual View (pour acquisitions simultanées):

- Fura 2 / IR visible: D520/60m, 565ldx, D660p/10m

- Indo1 (2 émissions): D405/30m, 440dclp, D485/25m

Caméra :

CCD CoolSnap HQ monochrome (Photometrics)

Logiciels :

Metamorph et Metafluor (Molecular Devices)

Axon pClamp 10

Electrophysiologie :

Micro-manipulateur Exfo Burleigh

Axopatch 200B

Digidata 1440

Stimulateur électrique HAMEG

Accessoires :

Chauffe-objectif 40x huile

Chauffage de la chambre d'observation

Système de perfusion

Chambres de perfusion pour lamelles de 15, 18 et 25 mm